Diagnostic utility of PELP1 and GATA3 in primary and metastatic triple negative breast cancer / Utilidad diagnóstica de PELP1 y GATA3 en cáncer de mama triple negativo primario y metastásico

Introduction: Metastasis from Triple-negative breast cancer (TNBC) is a significant cause of morbidity and death and also presents a diagnostic challenge. There are significant therapeutic implications for making a correct and timely diagnosis of metastatic TNBC because the tumors may respond to chemotherapy. PELP1 expression has been reported recently in BC but is poorly studied in the diagnosis of primary and metastasis of TNBC.ObjectivesThe aim of the present study is to assess the diagnostic utility of PELP1and compare it with GATA3, the most commonly used in our practice for breast cancer.MethodsPELP1 and GATA3 were assessed by immunohistochemistry in formalin fixed paraffin embedded tissue blocks of 30 cases of primary TNBC and 15 cases of metastatic TNBC at the Pathology department, Zagazig University, Egypt.ResultsThe immunohistochemical expression of PELP1 revealed a higher frequency of expression than GATA3 in both primary and metastatic TNBC. PELP1 revealed a (96.67%) positive expression rate in primary TNBC and a (86.67%) positive in metastatic TNBC. In comparison to GATA3, revealed (53.33%) positive expression rate in primary TNBC and (60%) positive in metastatic TNBC. Furthermore, the majority of the PELP1 positive cases showed diffuse strong staining, making observation of the staining easy and suggested that PELP1 may be a molecular target for TNBC therapy. We predict that this analysis will shed light on PELP1's significance in TNBC.ConclusionIn comparison to GATA3, PELP1 protein expression is substantially higher in diagnosis of primary and metastatic TNBC. (AU)

Introducción: La metástasis del cáncer de mama triple negativo (TNBC) es una causa importante de morbilidad y muerte y también presenta un desafío diagnóstico. Existen importantes implicaciones terapéuticas para hacer un diagnóstico correcto y oportuno de TNBC metastásico porque los tumores pueden responder a la quimioterapia. La expresión de PELP1 se ha informado recientemente en BC, pero está poco estudiada en el diagnóstico de metástasis primaria y de TNBC.ObjetivosEl objetivo del presente estudio es evaluar la utilidad diagnóstica de PELP1 y compararlo con GATA3, el más utilizado en nuestra práctica para el cáncer de mama.MétodosPELP1 y GATA3 se evaluaron mediante inmunohistoquímica en bloques de tejido embebidos en parafina fijados con formalina de 30 casos de TNBC primario y 15 casos de TNBC metastásico en el departamento de Patología de la Universidad de Zagazig, Egipto.ResultadosLa expresión inmunohistoquímica de PELP1 reveló una mayor frecuencia de expresión que GATA3 en TNBC tanto primaria como metastásica. PELP1 reveló una tasa de expresión positiva (96,67%) en TNBC primario y un (86,67%) positivo en TNBC metastásico. En comparación con GATA3, reveló (53,33%) tasa de expresión positiva en TNBC primaria y (60%) positiva en TNBC metastásica. Además, la mayoría de los casos positivos de PELP1 mostraron una tinción fuerte difusa, lo que facilitó la observación de la tinción y sugirió que PELP1 puede ser un objetivo molecular para la terapia de TNBC. Predecimos que este análisis arrojará luz sobre la importancia de PELP1 en TNBC.ConclusiónEn comparación con GATA3, la expresión de la proteína PELP1 es sustancialmente mayor en TNBC primaria y metastásica. (AU)

Expression of mesenchymal stem cell phenotype in human nasal respiratory epithelial cells / Expresión del fenotipo de células troncales mesenquimales en células epiteliales nasales humanas

The respiratory epithelium is the first line of contact with the external hazards. Thus it can be damaged and need to be replaced to avoid healing by fibrosis. Tracheal tissue engineering is an alternative promising treatment modality. Mesenchymal stem cell markers are surface proteins, which are responsible for some of these cells unique properties. The objective of this study was to detect the mesenchymal stem cell phenotype among the human nasal respiratory epithelial cells via two immunophenotyping techniques. Respiratory epithelial cells were cultured using co-culture technique, fibroblasts was removed at confluence leaving respiratory epithelial cells, which were passage further to passage 4. Cells were evaluated for mesenchymal stem cell markers that were CD73, CD90, CD105 and the hematopoietic stem cell marker CD45 at passage 1 (P1) and passage 4 (P4) using Flow cytometry and Immunocytochemistry techniques. Respiratory epithelial cells expressed the mesenchymal stem cell markers at P1 and maintain the expression these markers until P4. Using both techniques, to compare the values of mesenchymal stem cell markers expression at P1 to P4 there was no significant difference. This study indicates that respiratory epithelial cells derived from nasal turbinate retain some of mesenchymal stem cells properties even after serial passages. Both methods of Immunophenotyping are comparable.

El epitelio respiratorio es la primera línea de contacto con los peligros externos. Por lo tanto, puede ser dañado y necesita ser reemplazado para evitar uan cicatrización por fibrosis. La ingeniería de tejidos traqueales es una modalidad de tratamiento alternativo prometedora. Los marcadores de células troncales mesenquimales son proteínas de superficie, que son responsables de algunas propiedades únicas de estas células. El objetivo fue detectar el fenotipo de células troncales mesenquimales entre las células epiteliales respiratorias nasales humanas a través de dos técnicas de inmunofenotipaje. Fueron cultivadas las células epiteliales respiratorias utilizando la técnica de co-cultivo; los fibroblastos se eliminaron en la confluencia dejando solo células epiteliales respiratorias, resultantes de los 4 pasajes. Las células fueron evaluadas para encontrar marcadores de células troncales mesenquimales mediante CD73, CD90, CD105 y el marcador de células troncales hematopoyéticas CD45 en el paso 1 (P1) y el paso 4 (P4), usando citometría de flujo y técnicas de inmunocitoquímica. Las células epiteliales respiratorias expresaron los marcadores de células troncales mesenquimales en P1 y mantuvieron la expresión de estos marcadores hasta P4. No hubo diferencias significativas en el uso de ambas técnicas al comparar los valores de los marcadores de células troncales mesenquimales expresadas desde P1 a P4. Este estudio indica que las células epiteliales respiratorias derivadas de la concha nasal retienen algunas de las propiedades de células troncales mesenquimales, incluso después de pases seriados. Ambos métodos de inmunofenotipificación son comparables.

Tinción dual inmunocitoquímica de p16INKa/Ki-67 para la detección de lesiones del cuello uterino asociadas a infección por el virus del papiloma humano / p16INK4a/Ki-67 immunocytochemical dual staining for detection of cervical lesions associated to papillomavirus infection

Este estudio se llevó a cabo para examinar el patrón de inmunoexpresión simultánea de p16INK4a/Ki-67y establecer su posible utilidad clínica para la detección precoz del cáncer de cuello uterino. Las muestras celulares de cuello uterino fueron seleccionadas de la pesquisa de rutina de cáncer cervical. La detección inmunocitoquímica de p16INK4a/Ki-67se realizó con el kit de trabajo CINtec® Plus. Todos los casos tenían una prueba de virus papiloma humano (VPH). Ciento quince muestras citológicas fueron incluidas: 11(9,6%) fueron negativas para lesión intraepitelial o malignidad (NILM), 32(27,8%) presentaron células escamosas con atipias de significado indeterminado (ASC-US), 62(53,9%) mostraron lesión intraepitelial escamosa de bajo grado (LSIL) y 10(8,7%) lesión intraepitelial escamosa de alto grado (HSIL). La prevalencia general de infección por VPH fue de 81,7% (94/115). En 42 casos (45,0%) se identificaron los siguientes genotipos específicos de VPH: VPH16 (26,2%), VPH51 (21,4%), VPH52 (14,3%) y el genotipo VPH66 (7,1%). De 115 muestras celulares, 42(36,5%) fueron positivas para la tinción dual de p16INK4a/Ki-67, siendo ésta muy frecuente en las muestras citológicas con HSIL (70,0%), disminuyendo en las LSIL (44,0%) y existiendo inmunopositividad en una minoría de ASC-US (25,0%). Ningún caso NILM mostró inmunopositividad para p1(6INK4a)/Ki-67 (p<0,001). En 40/115 casos (34,8%) hubo positividad tanto para infección por VPH oncogénico como para la tinción dual p16INK4a/Ki-67, incluyendo 6/32 (18,8%) con ASC-US, 26/62 (42,0%) con LSIL and 8/10 (80,0%) con HSIL. Esta metodología podría ser utilizada para detectar lesiones en cuello uterino que aún no han sido diagnosticadas o han pasado inadvertidas.

We aimed to explore the expression pattern of p16INK4a/Ki-67 immunocytochemical dual-staining and to establish the potential clinical utility for early detection of cervical lesions. Liquid-based cytologies of cervical specimens of cervical cancer screening were processed for p16INK4a/Ki-67 immunocytochemical dual-staining using the CINtec® Plus Kit. HPV testing was performed with the INNO-LiPA HPV genotyping Extra Reverse Hybridization Line Probe Assay kit. One hundred and fifteen cervical cytologies were analyzed with the following results: 11(9.6%) were negative for intraepithelial lesions or malignancy (NILM); 32(27.8%) presented atypical squamous cells of undetermined significance (ASC-US); 62(53.9%) exhibited low grade squamous intraepithelial lesions (LSIL) and 10(8.7%) showed high grade squamous intraepithelial lesions (HSIL). No cases of cervical cancer were detected. The overall prevalence of DNA HPV detection was 81.7% (94/115). The following specific HPV genotypes were identified in 42 (45.0%) cases: HPV16 (26.2%), HPV51 (21.4%), HPV52 (14.3%) and HPV66 (7.1%). Viral sequences of an unknown single HPV were detected in 23.8%of the cases. A total of 42/115 (36.5%) were p16INK4a/Ki-67 dual-staining-positive, being more frequent in HSIL (70.0%), decreasing in LSIL (44.0%), detected in a minority of ASC-US (25.0%) and negative in NILM cases (p<0.001). 40/115 cases (34.8%) were positive for both oncogenic HPV and p16INK4a/Ki-67 dual-staining, including 6/32 (18.8%) ASC-US, 26/62 (42.0%) LSIL and 8/10 (80.0%) HSIL, which represent a strong association between positivity for HPV, p16INK4a/Ki-67 staining and severe cytological abnormalities (p<0.001). This methodology could be used to detect unnoticed cervical lesions.

Expresión inmunohistoquímica de PCNA, Ki-67 y ciclina D1 en ameloblastomas multiquísticos / Immunohistochemical expression of PCNA, Ki-67 and cyclin D1 in solid ameloblastomas

Introducción: el ameloblastoma es un tumor odontogénico benigno, localmente agresivo, que debe su origen a partir de estructuras epiteliales involucradas en la odontogénesis. El objetivo del presente trabajo es identificar, por medio de técnicas inmunohistoquímicas, aspectos de los mecanismos regulatorios de proliferación celular y la relación de los diferentes subtipos histológicos con el comportamiento biológico de estos tumores. Materiales y métodos: se seleccionaron 10 ameloblastomas multiquísticos en los cuales se realizó inmunotinción con los marcadores PCNA, Ki-67 y Ciclina D1. La interpretación de las tinciones se basó en la intensidad, localización y los subtipos celulares. La valoración utilizada para contabilizar el número de células fue baja (menos del 10 por ciento), media (hasta el 50 por ciento) y alta (más del 50 por ciento). Resultados: la tinción fue positiva en 6 casos para PCNA, en 3 para Ki-67 y en 5 para ciclina D1, en las células basales periféricas, en los patrones foliculares y plexiformes, en las del esbozo del retículo estrellado y fue negativa en los patrones quísticos y acantomatosos. Conclusión: en base a los hallazgos se puede asumir que las células basales y parabasales de los patrones foliculares y plexiformes presentan mayor actividad proliferativa que otros patrones y determinarían la evolución y tratamiento

Expresión inmunohistoquímica de PCNA, Ki-67 y ciclina D1 en ameloblastomas multiquísticos / Immunohistochemical expression of PCNA, Ki-67 and cyclin D1 in solid ameloblastomas

Introducción: el ameloblastoma es un tumor odontogénico benigno, localmente agresivo, que debe su origen a partir de estructuras epiteliales involucradas en la odontogénesis. El objetivo del presente trabajo es identificar, por medio de técnicas inmunohistoquímicas, aspectos de los mecanismos regulatorios de proliferación celular y la relación de los diferentes subtipos histológicos con el comportamiento biológico de estos tumores. Materiales y métodos: se seleccionaron 10 ameloblastomas multiquísticos en los cuales se realizó inmunotinción con los marcadores PCNA, Ki-67 y Ciclina D1. La interpretación de las tinciones se basó en la intensidad, localización y los subtipos celulares. La valoración utilizada para contabilizar el número de células fue baja (menos del 10 por ciento), media (hasta el 50 por ciento) y alta (más del 50 por ciento). Resultados: la tinción fue positiva en 6 casos para PCNA, en 3 para Ki-67 y en 5 para ciclina D1, en las células basales periféricas, en los patrones foliculares y plexiformes, en las del esbozo del retículo estrellado y fue negativa en los patrones quísticos y acantomatosos. Conclusión: en base a los hallazgos se puede asumir que las células basales y parabasales de los patrones foliculares y plexiformes presentan mayor actividad proliferativa que otros patrones y determinarían la evolución y tratamiento (AU)